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微生物限度檢查

    微生物限度檢查法是指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。檢查法有平皿法和濾膜法，都可借助全自動(dòng)菌落分析儀實(shí)現(xiàn)菌落自動(dòng)計(jì)數(shù)。  
    微生物限度檢查法應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級(jí)下的局部潔凈度100 級(jí)的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。檢驗(yàn)全過(guò)程必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺(tái)面及環(huán)境應(yīng)定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室( 區(qū) )懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法》的現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行潔凈度驗(yàn)證。  
    供試品檢查時(shí)，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物的生長(zhǎng)和存活無(wú)影響。除另有規(guī)定外，本檢查法中細(xì)菌培養(yǎng)溫度為 30 ～ 35℃ ；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為 23 ～ 28‘C ；控制菌培養(yǎng)溫度為35 ～ 37℃ 。檢驗(yàn)結(jié)果以 1g 、 1m1 、 10g 、 10ml 或 10cm 為單位報(bào)告。  
    細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)檢查法：   
    平皿法：取均勻供試液，用 pH7.0 氯化鈉 - 蛋白胨緩沖液稀釋成 1 ∶ 102 、 1 ∶ 103 等稀釋級(jí)，取適宜的連續(xù) 2 ～ 3 個(gè)稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行菌數(shù)測(cè)定。 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌計(jì)數(shù)，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌計(jì)數(shù)。在特殊情況下，前者同時(shí)點(diǎn)計(jì)霉菌、酵母菌菌落數(shù)，后者同時(shí)點(diǎn)計(jì)細(xì)菌菌落數(shù)。酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計(jì)數(shù)。合劑用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基與酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基分別測(cè)定霉菌、酵母菌菌落數(shù)，合并計(jì)數(shù)。液體制劑用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基同時(shí)點(diǎn)計(jì)霉菌菌落數(shù)及酵母菌菌落數(shù)。  
    過(guò)濾法： 應(yīng)采用開(kāi)放式薄膜過(guò)濾法，濾膜的孔徑不大于 0.45 μm。選擇濾膜材質(zhì)時(shí)應(yīng)考慮供試品及其溶劑的特性。培養(yǎng)和計(jì)數(shù)同平皿法，每片濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不多于 100 個(gè)。


 




 
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